(◕‿-) Mush Mush galerija

[faceOff]

Jedina komplikacija je napravit tegle. Ali ih imaš za ne znam koliko puta.
A sve kasnije je laganini. Ležerno, sa duvanom u ustima...

[Poor noob]

Deda
Nikad mi nije iz bilo kakve šprice(MS ili LC) micelij rastao na takav način, samo s gornje strane. Ali nikad nisam stavljao 1ml kao što si ti. Išao sam sa minimalno 2ml.
Valjda bi onda dobar dio tekućine došao do dna tegle i tu bi počeo najžešći rast

A što se tiče opsjednutosti agarom, ne znam što reći.
Ali evo neke moje igre s njim
Smislio sam način koji se pokazao 100% učinkovit, funkcionalan i jednostavan. Prije toga sam pripremao agar na dva načina
1. Da ga steriliziram u teglama. Pa onda on prska dok kuha i ostane zaljepljen po stjenkama, pa kondenzacija... Kurca ne vidiš poslje
2. Steriliziram ga u velikoj tegli, pa čekam da se ohladi. Pa u SABu preljevam u manje tegle ili u petrijevke. Bolan proces. Dio bude kontaminiran...

Dopizdilo mi pa sam ovo osmislio
Steriliziram agar u velikoj tegli. Poklopac ima silikonski port. I malu rupicu prekrivenu mikropore trakom. Čekam da se ohladi toliko da samo što se nije počeo zgušnjavati. Ako krene u tvrdo samo ga stavim u vruću vodu. Sterilnom špricom od 20ml i iglom(plamen alkohol) izvučem agar i ubrizgam u prethodno sterilizirane ovakve tegle. U kuhinji za stolom





Nema zajebancije sa SABom, nema kondenzacije, nema kontaminacija

Ovo govorim jer može dobro poslužiti za testiranje printa. Ok, hoće ljudi odma na agar. Kao sigurno je, a ne shvaćaju da si produžavaju proces pun k, da se ograničavaju genetikom i da sigurno najbolju genetiku izostavljaju, nije uopće jednostavno. Pa testiranje... Nebitno.
Ali vrijedi od dijela printa uvijek napraviti MS soluciju i probati odraditi grow.
A u ovako pripremljene teglice sa agarom je lako ubrizgati par kapi solucije na par mjesta i vidjeti na čemu si sa kontaminacijama.

Imam jedan print za koji sam siguran da je kontaminiran. Traljavo napravljen, prošao je i avanturu sa radoznalim desetogodišnjakom... Probati ću napraviti ovakav test.

Drugi test koji mislim je ovo

U špricu sa par ml iste MS solucije ću uvući par ml LC tekućine. Ali prvo ću pustiti par dana da spore germiniraju u čistoj vodi, pa onda uvući LC. Onda ću jednu kap ubrizgati na agar bez nutrijenata. Koliko znam micelij bi trebao nastaviti rasti i na nehranjivoj podlozi ako ima hrane u toj kapi LCa. Kao kad ostaviš agar ili žitarice predugo, pa se mic počme penjati po staklenki. A bakterije bi valjda trebale stati na rubu hrane. Onda je lako transfer odraditi.
Samo ne znam jel bakterijama može izvor hrane biti agar agar
A plijesni... ne znam. Vjerovatno kao micelij. Isto su kraljevstvo
Storm?
Ali igra je u pitanju, tako da i nije toliko bitno

Faceoff moze jedno pitanje?
Agar koji je odstaja predugo i pocea se penjat po stranama, mogu li ga dalje koristit? Tipa ubacit u zito ili odradit transfer na nove agare?
Imam takav problem posto san se malo zatrpa agarima jer mi nema smisla bacat ga u novo zito kad vec iman tegle na cekanju za kokos…
Cita san po shroomeriju da agar i zito u kojem je micelij sve kolonizira i tako stoji par tjedana nije dobar.
Navodno baci ga u neki mod di mu cilj vise nije da fokusira snagu na ispaljivanja gljiva vec samo sirenje radi prezivljavanja…

[faceOff]

...

Jebiga, ne bi ti znao reći zašto se uzima sa rubnih dijelova micelija na agaru. Mislim ima mi smisla zdravorazumski, ali nemam pojma koji su biološki mehanizmi u igri.
Prije sam agar radio u višljim teglicama i u jedan takav prekolonizirani agar sam iz zajebancije ubacio sterilnih žitarica. Brzo i lako se sve koloniziralo, napravio sam g2g u tri tegle.
Jednu kantu sam odradio s tim i sasvim normalno je bilo.
Ne znam gdje se najbolje mic razvijao. Sa ruba agara i stakla, ili iz središnjeg dijela...

Što se tiče tvog eksperimenta, ne treba nikad mešati LC i MS. A i zašto misliš da će spore germinirati u čistoj vodi, to se retko kad dešava. Ko radi sa tečnom kulturom tu su apsolutno obavezni klonovi ili biopsije sa agar plejta. Mislim nisu obavezni, al sve drugo je van pameti. Što se tiče samog agara ima on polisaharida tj šećera, dakle ima određenu hranljivu vrednost. Prema tome napašće ga kad tad mikroorganizmi. Tu je i ta kap LC što opet nosi mogućnost kontaminacije samo po sebi.

Znam da germiniraju, ali kada je pitanje. Imao sam od različitih printova spremljene šprice. Kad bi ih upotrebljavao dosta kasnije(6+ mjeseci), gotovo redovito bi na oko vidio niti u šprici. Imao bi jebade razbiti ih

Drugo iskustvo je ovo. Kad bi inokulirao tegle praktički odmah nakon pravljenja MS šprice, duže bi trebalo da micelij bude vidljiv na pšenici, nego kad bi inokulaciju napravio nakon desetak dana. Jesu li spore germinirale ili su ušle u neku predfazu, ne znam, ali to je tako u mom slučaju

Uvukao malo LC u soluciju neposredno prije stavljanja na čisti agar bez nutrijenata. Da mic ima hrane za krenuti dalje, van te kapi na agaru
Možda nema smisla, al jebiga, ne mogu drugačije funkcionirati. Na svim područjima je tako. Puno puta bude pun pogodak, a suluda stvar i vanka svih pravila. Puno puta zajebem... A i to je isto ok

[storm.raver]

Naravno, treba eksperimentisati. Eto skoro je kale izvrsio operaciju na otvorenom mozgu gde je spasao supstrat koji bih ja bacio odavno. Ne ulazim u to da li je taj micelij akumulirao toksine,verovatno jeste, ali bez obzira inducirani su plodovi i nije ih zahvatila budj, sto je uspeh. Tako da treba pokusati uvek razlicte stvari.

Sto se tice germinacije, znam kako to funkcionise iz bioloskog aspekta, ali nisam siguran jer nikad nisam posmatrao pod mikroskopom te filamente, tako da ovo sto cu sada reci je moje misljenje:

Na opni spore nalaze se hemijski receptori koji su aktivirani ukoliko su nutritivno-hemijski agonisti prisutni, na primer seceri. Tada spora dobija signal i prekida dormantno stanje i pocinje vegetativni rast. Ukoliko je spora hidrirana lakse je probiti presinapticku opnu i proklijati. U vodi dolazi do hidratacije spore tako da ona natice i moze zapoceti svoj zivotni ciklus. OK, ovaj deo je naucno podrzan, ali ja smatram da s obzirom na nedostatak hranljivih sastojaka u vodi, a spora je krenula u formiranje hifa, te hife nemaju resursa da odrzavaju metabolizam koji se pokrenuo, i zato odumiru. Tako da smatram da su sve filamentne strukture koje se ponekad vide u spricu zapravo mrtav micelijum. Prosto mi je neverovatno da vegetativni organizam prezivi u apsolutnom odsustvu hrane mesec dana. Vecina spora ima funkcionalne regulatorne kanale i receptori ostanu neaktivirani tako da ne dolazi do tog akcidentalnog klijanja u spricu. Tako da to sto je proklijalo nema nikakvu vaznost, jer je mrtvo. Preostale dormantne spore koje ce u normalnim uslovima proklijati su one koje su bitne.

[faceOff]

Bit će onda da radi hidracije prije germiniraju, pa se prije pokaže
A ove germinirane? Pretpostavljam da mineralni sadržaj vode nema veze. Ili? Prije sam samo vodu iz vodovoda koristio

[Deda]

Storm,print je kupovni sa redita,Mico rebel cini mi se da je lik,bio je stvarno bogat otisak,bas crn tako da sam napravio 5 sprica od pola printa i cini mi se sasvim dovoljno,Taman Negara strain
Face,i ja sam prvi put dodao 2 ml,ovo mi je tek drugi grow i zasto sam dodao samo 1 ml,kad sam prokuhao jecam i pokusao ga osusiti skuzio sam da je upio previse vode i nikako da se osusi,kuhao sam samo 10 minuta ali mozda je vatra bila prejaka pa je ipak bilo previse,nikako ga nisam mogao posusiti i na kraju sam ga ostavio 24h da se susi pa sta bude,sutra mi se cinio suh izvana ali kad ga stisnes prstima vidis da ima u sebi jos puno vode ali kontam idem dodati spore pa sta bude ali samo 1 ml i izgleda da je bilo taman

[faceOff]

Mda, mislim da ću i ja kreniti sa 1ml kad je MS u pitanju. Ima smisla. Iako do sada nisam imao problema osim kad je print bio kontaminiran. Rijetko doduše. Mada po ovom što storm kaže, možda bi uspješnost bila i veća. A i duplo više tegli...
Sa LC ostavljam na 2ml. Odmah mic krene i tegle su u tren gotove

[storm.raver]

Bit će onda da radi hidracije prije germiniraju, pa se prije pokaže
A ove germinirane? Pretpostavljam da mineralni sadržaj vode nema veze. Ili? Prije sam samo vodu iz vodovoda koristio

Ne znam stvarno, više razmišljam naglas, čisto da pokušamo zajedno shvatiti. Moram definitivno više čitati na ovu temu. Moguće da mineralni utiču, receptori sigurno imaju jonske kanale, a kalcijuma obično ima u vodi iz slavine. Bilo bi interesantno uraditi desetak špriceva sa destilovanom vodom, pokušati isključiti faktor minerala.

[Deda]

Bit će onda da radi hidracije prije germiniraju, pa se prije pokaže
A ove germinirane? Pretpostavljam da mineralni sadržaj vode nema veze. Ili? Prije sam samo vodu iz vodovoda koristio

Ne znam stvarno, više razmišljam naglas, čisto da pokušamo zajedno shvatiti. Moram definitivno više čitati na ovu temu. Moguće da mineralni utiču, receptori sigurno imaju jonske kanale, a kalcijuma obično ima u vodi iz slavine. Bilo bi interesantno uraditi desetak špriceva sa destilovanom vodom, pokušati isključiti faktor minerala.

Vidis to sam zaboravio spomenuti,svi moji spricevi su radjeni sa RO vodom(reversna osmoza) a takodje i jecam sam natapao u takvoj vodi,znaci minerali 0,e sada dali ima veze nemam pojma

[Poor noob]

Evo, neke su ready za berbu, izgledaju puno zdravije nego prosla tura kojoj san previse paznje pridava pa je skoro zasra…
media/images4/1648471069.jpg
media/images4/1648445141.jpg