kale.kikor je napisao/la: ↑17.08.2022, 13:45
spric je boljiod spora jer tada spore imaju kraci kontakt sa kontaminiranim vazduhom.
Mozes i direkt sa prita u teglu sa zrnevljem, ali su vece sanse da se spore ''isprljaju'', posle mozes ili da bacis prit ili da ga cistis agar tehnikom, sto je bol u dupetu(pain in the ass)
Ja sam spore u spric ovako ubacivao:
- kada u expres loncu sterilisem zrnevlje, u jednu zasebnu teglu ubacim par desetina mililitara destilovane vode i pokrijem je alu folijom
- u lonac ubacim i casicu za rakiju koju sam prethodno uvio u alu foliju, uz to je nisam obavio 10 puta folijom, nego cisto onako, da je zastitim od kontaminacije kad je budem premestao iz lonca u SAB
- sve to sterilisem u loncu na 11 psi 90 min.
- obican spric od 10 ccm i iglu mozes da kupis u svakoj apoteci (ne znam da li je bitna debljina igle, ali ja sam uvek koristio one deblje)
- kada se lonac ohladio, prebrisem ga izopropilom i stavim ga pored SAB-a da sto manje bude izlozen kontaminiranom vazduhu
- sto manje naglih pokreta i sto brze sve budes uradio to su ti vece sanse za uspeh
- iz lonca u sab ubacim teglu sa vodom i shot casicu koju otvaram( iz alu folije) tek kad je u SAB-u
- spric i igla ako su upakovani kako treba, moraju biti sterilni tako da nema potrebe i njih da sterilises u express loncu, samo ih, dok su zapakovani, prebrisem izopropilom i tako ubacim u sab
- to isto uradim sa printom - zip kesicu u kojoj je, prebrisem alkoholom i turim u sab(od svega najvise cuvaj print sa sporama jer ako ti se on uprlja, sve dalje sto radis je uzaludno, jer ces sa sporama u tegle ubacivati i kojekakvu gamad.
- sada kad imam sve cisto u SAB-u, bacam se na posao...
- rakijsku casicu odpakujem iz folije, izvadim print iz kesice i sterilnim skalpelom sastruzem malo spora u casicu(ne treba ti nista puno, na printu se nalaze milioni spora tako da ce jedan centimetar kvadratni biti sasvim dovoljno za spric
- potom odpakujem spric, na njega stavim iglu, skinem foliju sa tegle i napunim spric SKORO do kraja( bitno je da imas malo vazduha u spricu da bi mogao da promuckas spore u spricu kad ga protreses, da bi, kada ubrizgavas spore u tegle, bile ravnomerno rasporedjene u spricu( ako nemas malo vazduha u spricu, nece moci da se promucka))
- sada imas casicu sa sporama i spric sa vodom; spric istisnes u casicu i sada imas cistu vodu punu tecnosti koju pokupis nazad u spric
- neko onda opet istisne tu tecnost nazad u casicu da bi se spore bolje promesale, da nema ''grudvica'' spora, vec da budu ravnomerno rasporedjene u spricu
- sada ti je spric spreman za upotrebu
- ako si sve dobro uradio, igla je i dalje sterilna, ali kao meru predostroznosti, pre ubrizgavanja u tegle je dobro sterilisati iglu na vatri dok ne postane crvena od usijanja.
- najbolje unapred da pripremis i staklenke ili agar koj zalis da inokuliras sporama, pa odma cim napravis spric sa sporama, te spore ubacis u tegle
- po tegli je dovoljno 1 ccm vode sa sporama, tako da u spricu od 10 ccm imas tecnosti za 10 tegli
Nasam se da sam ista pomogao